关于简论β-arrestin2介导的信号通路在丹栀逍遥散防治大鼠PCOS中的作用机制-毕业设计论文总结

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简论β-arrestin2介导的信号通路在丹栀逍遥散防治大鼠PCOS中的作用机制-毕业设计论文总结

论文预读:泡发育异常构成PCOS的主要病理特征。其中,IR是PCOS基础病理特征,促进高雄激素血症产生,又与HA,高促黄体激素(luteinizing hormoneLH)血症等相互作用,影响下丘脑—垂体—卵巢轴功能和卵泡发育异常。如何改善PCOS患者胰岛素抵抗,脂代谢紊乱,肥胖等代谢紊乱症状,目前并没有非常有效的治疗方法。疏肝、健脾、清热的经典方剂丹栀逍简论β-arrestin2介导的信号通路在丹栀逍遥散防治大鼠PCOS中的作用机制-毕业设计论文总结

摘要:研究背景和目的作为青春期及育龄女性最常见的妇科内分泌疾病,多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome, PCOS)发病率3%-8%。其病因不详。PCOS不仅涉及生殖系统,而且是一个复杂的多系统综合征,相关的代谢失调包括胰岛素抵抗(insulin resistance, IR)、高雄激素血症(high androgens, HA),糖代谢异常、脂代谢异常等。目前认为PCOS是一种表现为IR、代偿性高胰岛素血症、高雄激素血症、下丘脑—垂体—卵巢轴功能异常的常见慢性内分泌疾病。IR或高胰岛素血症、高雄激素血症和卵泡发育异常构成PCOS的主要病理特征。其中,IR是PCOS基础病理特征,促进高雄激素血症产生,又与HA,高促黄体激素(luteinizing hormoneLH)血症等相互作用,影响下丘脑—垂体—卵巢轴功能和卵泡发育异常。如何改善PCOS患者胰岛素抵抗,脂代谢紊乱,肥胖等代谢紊乱症状,目前并没有非常有效的治疗方法。疏肝、健脾、清热的经典方剂丹栀逍遥散(DanZhi XiaoYao Power, DZXYP)是《太平惠民和剂局方》逍遥散加丹皮、山栀而来,又名加味逍遥散。临床研究表明,丹栀逍遥散可以改善肝经郁热型PCOS患者临床症状和体征,有效率达77%和88.33%;同时,该药能够显著增强Ⅱ型糖尿病患者胰岛素敏感性而降低胰岛素抵抗水平。降低湿热内蕴型肥胖伴非酒精性脂肪性肝病患者体重指数,腰臀比,血脂,并且改善胰岛素抵抗,预防高血压,糖尿病。DZXYP是否可以治疗PCOS性激素紊乱,排卵障碍的同时,改善其代谢紊乱表现,目前尚无相关报道。其作用机制不清楚。我们拟建立PCOS大鼠模型,观察DZXYP改善PCOS大鼠代谢紊乱,性激素紊乱和卵泡发育异常的疗效。选用基于双向电泳的蛋白质组学技术研究分析PCOS发病机制及DZXYP的作用靶标,为DZXYP用于临床治疗PCOS提供依据,为深入研究PCOS发病机制及DZXYP作用机理奠定基础。方法1PCOS动物模型制备与分组给药采用随机数字表法将动物分为PCOS模型组(PCOS组)、PCOS十达英35组(PCOS+Diane-35组)、PCOS+丹栀逍遥散组(PCOS+DZXYP)组和正常对照组(Control组),每组10只。皮下埋植左旋18-****炔诺酮硅胶棒和皮****射hCG制造PCOS模型;35日龄开始,灌胃方式给药。实验开始及结束分别称重并计算体重差(body weight gain difference, BWGD),实验结束时,左心室采血5mL,-80℃保存备用;分离卵巢记录卵巢重量(ovary weight, OW);取卵巢组织用于病理切片观察和其他检测。2组织学检查卵巢组织常规脱水、透明、浸蜡、包埋,5μm切片,常规苏木精-伊红(hemotoxylin and eosin, HE)染色,显微镜分析图像,进行组织病理学检查。3检测血糖、血脂、E2、T和胰岛素生化分析仪检测各组大鼠的甘油三酯(triglyceride, TG)、总胆固醇(total cholesterol, TC)、低密度脂蛋白(low density lipoprotein, LDL)、高密度脂蛋白(high-density lipoprotein, HDL)和空腹血糖(fasting blood glucos,FBG)。血清睾酮(testosterone, T),雌二醇(estradiol, E2)和空腹胰岛素水平(fasting insulin, FINS)用西门子ADVIA Centaur XP全自动免疫分析系统及其化学发光配套试剂进行检测。4蛋白液相芯片检测FSH和LH选用Rat Pituitary Magnetic Bead Panel (RPTMAG-86K)试剂盒,在LiquiChip液相芯片检测系统上读取各孔荧光强度,并根据标准品的荧光强度得到样品的FSH和LH浓度。5双向电泳、质谱鉴定及分析DZXYP调控PCOS大鼠的差异蛋白双向电泳参照IPGPhorⅢ等电聚焦系统程序指南和IPGstrip使用说明书进行操作,硝酸银染色后所得凝胶经对比找出差异蛋白,应用Voyager DE STR MALDI-TOF-MS(ABI)进行鉴定,获取肽质量指纹谱。利用软件mascot distiller过滤基线峰,识别信号峰。利用MOlecular Weight Search (MOWSE)寻找匹配的相关蛋白质,查询其功能。6免疫组织化学技术检测大鼠β-arrestin2, PCNA蛋白表达按

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