关于研讨KRAB型锌指蛋白ZNF268在人宫颈癌发生过程中的功能及分子机制-科技论文(2)

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研讨KRAB型锌指蛋白ZNF268在人宫颈癌发生过程中的功能及分子机制-科技论文(2)

论文预读:2.2 材料与方法29-342.2.1 材料29-302.2.2 仪器设备302.2.3 方法30-342.2.3.1 免疫组化30-322.2.3.2 定量PCR检测ZNF268各种转录本的表达32-342.3 实验结果34-392.3.1 ZNF268在人不同组织中的表达34-352.3.2 ZNF268在人宫颈组织中的表达35-392.3.2.1 ZNF268蛋白在人宫颈组织中的表达36-382.3.3.2 ZNF268 RNA在人宫颈组织中的研讨KRAB型锌指蛋白ZNF268在人宫颈癌发生过程中的功能及分子机制-科技论文(2)

锌指蛋白生物学功能20-23
  • 1.3 ZNF268研究进展23-27
  • 1.3.1 ZNF268基因的结构特征23-24
  • 1.3.2 ZNF268潜在的生物学功能24-27
  • 1.3.2.1 ZNF268与人胚胎肝脏发育相关24-25
  • 1.3.2.2 ZNF268与造血系统发育相关25-27
  • 第二章 ZNF268在人正常及肿瘤组织中的表达27-42
  • 2.1 前言27-29
  • 2.2 材料与方法29-34
  • 2.2.1 材料29-30
  • 2.2.2 仪器设备30
  • 2.2.3 方法30-34
  • 2.2.3.1 免疫组化30-32
  • 2.2.3.2 定量PCR检测ZNF268各种转录本的表达32-34
  • 2.3 实验结果34-39
  • 2.3.1 ZNF268在人不同组织中的表达34-35
  • 2.3.2 ZNF268在人宫颈组织中的表达35-39
  • 2.3.2.1 ZNF268蛋白在人宫颈组织中的表达36-38
  • 2.3.3.2 ZNF268 RNA在人宫颈组织中的表达38-39
  • 2.4 讨论39-42
  • 第三章 下调ZNF268对宫颈癌细胞HeLa增殖的影响42-67
  • 3.1 前言42-43
  • 3.2 材料和方法43-52
  • 3.2.1 材料43-44
  • 3.2.1.1 细胞系43
  • 3.2.1.2 干扰慢病毒载体43
  • 3.2.1.3 试剂盒和抗体43-44
  • 3.2.1.4 主要试剂及其配制44
  • 3.2.1.5 仪器设备44
  • 3.2.2 实验方法44-52
  • 3.2.2.1 ZNF268下调稳转HeLa细胞系的建立44-45
  • 3.2.2.2 Western blot45-47
  • 3.2.2.3 MTT法47-48
  • 3.2.2.4 软琼脂实验48
  • 3.2.2.5 EdU标记48-49
  • 3.2.2.6 PI染色检测细胞周期和凋亡49
  • 3.2.2.7 Confocal检测细胞凋亡49-50
  • 3.2.2.8 细胞划痕50
  • 3.2.2.9 裸鼠皮下成瘤50-51
  • 3.2.2.10 HE染色51
  • 3.2.2.11 免疫组化51-52
  • 3.3 实验结果52-64
  • 3.3.1 ZNF268下调稳转HeLa细胞系的建立52-53
  • 3.3.2 ZNF268下调对HeLa细胞增殖的影响53-55
  • 3.3.3 ZNF268下调对HeLa细胞增殖脱靶效应的排除55-56
  • 3.3.4 ZNF268下调对HeLa细胞周期的影响56-58
  • 3.3.5 ZNF268下调对TNFα诱导HeLa细胞凋亡的影响58-60
  • 3.3.6 ZNF268下调对HeLa细胞迁移的影响60-61
  • 3.3.7 ZNF268下调对HeLa细胞裸鼠皮下成瘤的影响61-64
  • 3.4 讨论64-67
  • 第四章 ZNF268影响宫颈癌细胞HeLa增殖机制研究67-90
  • 4.1 前言67-69
  • 4.2 材料与方法69-75
  • 4.2.1 材料69-70
  • 4.2.1.1 细胞69
  • 4.2.1.2 质粒69-70
  • 4.2.1.3 试剂70
  • 4.2.2 方法70-75
  • 4.2.2.1 载体构建70-71
  • 4.2.2.2 检测报告基因荧光素酶活性71
  • 4.2.2.3 Western blot71
  • 4.2.2.4 免疫沉淀71-72
  • 4.2.2.5 胞质胞核蛋白分离72
  • 4.2.2.6 凝胶阻滞实验(EMSA)72-74
  • 4.2.2.7 免疫组化74-75
  • 4.3 实验结果75-87
  • 4.3.1 ZNF268和NF-κB通路在宫颈癌发生过程中的相关性75-76
  • 4.3.2 ZNF268对NF-κB通路活性的影响76-82
  • 4.3.3 ZNF268下调对HeLa细胞裸鼠皮下成瘤中NF-κB通路的影响82-85
  • 4.3.4 NF-κB通路对ZNF268功能的影响85-87
  • 4.4 讨论87-90
  • 第五章 KRAB核定位功能及机制研究90-122
  • 5.1 前言90-92
  • 5.2 材料与方法92-106
  • 5.2.1 材料92-95
  • 5.2.1.1 菌株及细胞系92
  • 5.2.1.2 载体92
  • 5.2.1.3 试剂92-93
  • 5.2.1.4 主要培养基及溶液配制93-94
  • 5.2.1.5 仪器设备94-95
  • 5.2.2 实验方法95-106
  • 5.2.2.1 载体构建95-102
  • 5.2.2.2 细胞培养102-103
  • 5.2.2.3 细胞转染103
  • 5.2.2.4 Confocal检测103-104
  • 5.2.2.5 GST Pull down104-105
  • 5.2.2.6 Western blot105-106
  • 5.3 实验结果106-118
  • 5.3.1 载体构建106-107
  • 5.3.2 KRAB核定位功能研究107-109
  • 5.3.3 KRAB发挥核定位功能的关键位点109-112
  • 5.3.4 KRAB作为NLS的普遍性112-114
  • 5.
  • 论文随机片段:.1 ZNF268蛋白在人宫颈组织中的表达36-382.3.3.2 ZNF268 RNA在人宫颈组织中的表达38-392.4 讨论39-42第三章 下调ZNF268对宫颈癌细胞HeLa增殖的影响42-673.1 前言42-433.2 材料和方法43-523.2.1 材料43-443.2.1.1 细胞系433.2.1.2 干扰慢病毒载体433.2.1.3 试剂盒和抗体43-443.2.1.4 主要试剂及其配制443.2.1.5 仪器设备443.