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简论均相法检测小而密低密度脂蛋白浓度的-论文 格式

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摘要:小而密低密度脂蛋白(sd-LDL)是动脉粥样硬化发生、发展的重要标志物,监测血浆中sd-LDL的浓度对临床动脉粥样硬化性心血管疾病的诊治、病情判断具有重要意义。然而,目前检测血清sd-LDL浓度检测的方法均难以广泛应用于临床,故研发一种检测迅速、操作简便、精密度高且适用于临床的方法显得尤为迫切。据最新国外文献报道,一种能采用全自动生化仪直接测定sd-LDL浓度的均相法有望实现临床sd-LDL浓度监测的突破,其实施的关键是选择对特定脂蛋白组分有强解离度的表面活性剂。本文以表面活性剂与特定脂蛋白选择性解离作用的研究为切入点,对这种新型检测sd-LDL浓度的方法进行剖析。首先,利用超速离心法分离纯化血清中各组分脂蛋白,并优化了分离条件,得到分离各种亚型脂蛋白的最佳密度参数;同时提取了所需的高纯度各种亚型脂蛋白。其次,选用阳离子、阴离子、非离子等近百种商业表面活性剂,研究表面活性剂的结构特征与其对脂蛋白选择性解离作用之间的规律。结果发现:亲水亲油值(HLB值)在10-14之间的非离子表面活性剂对脂蛋白的解离作用较强;聚乙二醇类非离子表面活性剂EM701和JK-14对高密度脂蛋白有一定的选择性解离作用。然后,根据分析总结的规律,探索性地设计合成了近30种聚乙二醇类非离子表面活性剂,进而筛选出对特定脂蛋白选择性解离作用更好的表面活性剂。研究合成的表面活性剂对脂蛋白的选择性解离作用,结果显示:表面活性剂聚乙二醇3-苄氧基****醚对除sd-LDL外各组分脂蛋白(主要包括高密度脂蛋白、极低密度脂蛋白和乳糜微粒)均有较高的解离度。最后,将表面活性剂聚乙二醇3-苄氧基****醚用于配制检测sd-LDL浓度的试剂盒,并分别对含有高、中、低浓度sd-LDL的血清样本进行检测,结果显示:该配制的试剂盒对含中浓度的sd-LDL血清样本检测结果较好,但是对于高、低浓度的血清样本检测结果尚存在一定误差,因此,还有待进一步的研究与探索。 关键词:小而密低密度脂蛋白 sd-LDL均相法检测 脂蛋白与表面活性剂的作用
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  • 摘要5-6
  • Abstract6-9
  • 图表目录9-11
  • 注释表11-12
  • 1 绪论12-22
  • 1.1 脂蛋白与胆固醇12-15
  • 1.1.1 低密度脂蛋白的各个亚组分13
  • 1.1.2 小而密低密度脂蛋白的代谢过程13-14
  • 1.1.3 小而密低密度脂蛋白的主要作用14-15
  • 1.2 sd-LDL浓度的测定方法15-20
  • 1.2.1 梯度密度超速离心法15-16
  • 1.2.2 梯度凝胶电泳法16
  • 1.2.3 化学沉淀法16
  • 1.2.4 分子筛色谱分析法16
  • 1.2.5 毛细管电泳法16-17
  • 1.2.6 核磁共振光谱法17
  • 1.2.7 指标评估法17-18
  • 1.2.8 动态光散射法18
  • 1.2.9 均相法18-20
  • 1.3 均相法的技术要求20
  • 1.3.1 小而密低密度脂蛋白胆固醇检测结果的意义20
  • 1.3.2 均相法检测结果标准化目标20
  • 1.4 研究均相法检测sd-LDL浓度的新思路20-22
  • 2 脂蛋白的分离与纯化22-25
  • 2.1 材料与仪器22-23
  • 2.1.1 主要实验仪器22
  • 2.1.2 主要实验药品22-23
  • 2.2 实验方法23
  • 2.2.1 高密度脂蛋白的分离纯化23
  • 2.2.2 大而轻低密度脂蛋白的分离纯化23
  • 2.2.3 小而密低密度脂蛋白的分离纯化23
  • 2.2.4 乳糜微粒和极低密度脂蛋白的分离纯化23
  • 2.3 实验结果23-25
  • 3 商业表面活性剂的筛选25-30
  • 3.1 主要实验材料25-26
  • 3.2 实验方法26
  • 3.3 结果与讨论26-30
  • 4 表面活性剂的合成及评价30-53
  • 4.1 主要实验材料30-32
  • 4.1.1 实验仪器30
  • 4.1.2 实验试剂30-32
  • 4.2 实验方法32-50
  • 4.2.1 聚乙二醇烷基丁二酯类表面活性剂的合成及评价32-36
  • 4.2.2 聚乙二醇烷基单酯类表面活性剂的合成及评价36-40
  • 4.2.3 聚乙二醇-3-(4-甲氧基苄氧基)-2-丙醇的合成及评价40-43
  • 4.2.4 聚乙二醇苄氧基****醚类表面活性剂的合成及评价43-50
  • 4.3 结果与讨论50-53
  • 5 检测sd-LDL-C浓度试剂盒的评价53-57
  • 5.1 主要实验材料53
  • 5.1.1 主要实验仪器53
  • 5.1.2 主要实验药品53
  • 5.2 实验方法53-57
  • 5.2.1 试剂Ⅰ中组分的配制53-55
  • 5.2.2 试剂Ⅱ中组分的配制55
  • 5.2

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