关于试谈ACE2-Ang(1-7)-Mas轴介导的胰岛内皮功能对β细胞功能的调节及机制-毕业论文

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试谈ACE2-Ang(1-7)-Mas轴介导的胰岛内皮功能对β细胞功能的调节及机制-毕业论文

论文预读:成释放无显著差异,与WT组相比,WH组胰岛内皮细胞NO含量降低(P0.05),KH组较WH组胰岛内皮细胞NO进一步下降(P0.05)。与WT组相比,KO组胰岛组织eNOS mRNA的相对表达量呈下降趋势,但未达到统计学差异,ICAM-1及VCAM-1mRNA的相对表达量无明显差异。WH组较WT组胰岛组织内ICAM-1, VCAM-1mRNA的相对表达量增加(P0.05),eNO**RNA的相对表达试谈ACE2-Ang(1-7)-Mas轴介导的胰岛内皮功能对β细胞功能的调节及机制-毕业论文

摘要:目的:以血管紧张素转换酶2(ACE2)基因敲除小鼠为实验对象,探讨ACE2-Ang(1-7)-Mas轴对长期高脂喂养小鼠胰岛微循环及p细胞功能的影响。方法:野生型C57小鼠(WT)及ACE2基因敲除(KO)小鼠均分为普通饮食(WT, KO)和高脂饮食(WH, KH)两组,16周后,对四组小鼠行葡萄糖耐量实验(IPGTT)及葡萄糖刺激后胰岛素释放实验(IPIRT)检测胰岛功能,行胰岛素耐量实验(IPITT)检测外周组织胰岛素敏感性,以免疫组化法检测胰岛细胞内胰岛素相对含量(IRC),胰岛素阳性细胞密度(ICD),以胰岛内CD31染色检测胰岛内微血管密度(MVD), TUNEL法检测胰岛内细胞凋亡水平。胶原酶法分离四组小鼠胰岛细胞并进行体外静态培养,以硝酸还原酶法检测上清NO水平,以RT-PCR法检测胰岛组织内eNOS,ICAM-1, VCAM-1mRNA的相对表达量。结果:正常饮食条件下,与WT组相比,KO组IPGTT葡萄糖曲线下面积(AUCG)无明显差异,葡萄糖刺激后第一时相胰岛素分泌呈下降趋势,胰岛组织内胰岛素相对含量(IRC)、胰岛素阳性细胞核密度(ICD)略减低,胰岛组织内微血管密度(MVD)也有减少趋势,但均未达到统计学差异。高脂饮食条件下,WH组较WT组IPGTT葡萄糖曲线下面积(AUCG)显著增加(P0.05),葡萄糖刺激后第一时相胰岛素分泌减少,胰岛内胰岛素相对含量(IRC)下降(P0.05),胰岛组织内单位面积TUNEL阳性细胞数增加(P0.05)。而与WH组相比,KH组IPGTT葡萄糖曲线下面积(AUCG)进一步上升(P0.05),葡萄糖刺激后第一时相胰岛素分泌显著减少(P0.05),胰岛内胰岛素相对含量(IRC)、胰岛组织内微血管密度(MVD)明显下降(P0.05),胰岛组织内单位面积TUNEL阳性细胞数显著增加(P0.05)。WT组与KO组胰岛内皮细胞NO合成释放无显著差异,与WT组相比,WH组胰岛内皮细胞NO含量降低(P0.05),KH组较WH组胰岛内皮细胞NO进一步下降(P0.05)。与WT组相比,KO组胰岛组织eNOS mRNA的相对表达量呈下降趋势,但未达到统计学差异,ICAM-1及VCAM-1mRNA的相对表达量无明显差异。WH组较WT组胰岛组织内ICAM-1, VCAM-1mRNA的相对表达量增加(P0.05),eNO**RNA的相对表达量下降(P0.05)。KH组胰岛组织内ICAM-1(P<0.05), VCAM-1mRNA (P<0.05)的相对表达量较WH组进一步上升,eNO**RNA的相对表达量显著下降(P0.05)。结论:ACE2基因敲除加重长期高脂诱导小鼠胰岛内皮功能损伤、糖代谢异常及胰岛β细胞功能障碍。目的:探讨Mas下调对胰岛微血管内皮细胞(MS-1)脂性凋亡的影响及其对p细胞的调节效应。方法:利用小干扰RNA(siRNA)下调MS-1细胞Mas受体的表达,棕榈酸(PA)干预24h后,分别对四组细胞(MS-1, MS-1siRNA,MS-1PA, MS-1siRNA+PA)以流式检测细胞凋亡率,以Western blot法检测**t-eNOS信号通路、JNK、p38磷酸化水平及bcl-2,bax,caspase3蛋白水平的表达,以RT-PCR法检测FoxO1, p22phox, TNF-α mRNA的表达,以硝酸酶还原法法检测上清中NO水平。用siRNA及棕榈酸(PA)干预获得不同功能状态的MS-1细胞,并与小鼠胰岛β细胞(MIN6)共培养,以GSIS法检测MIN6细胞的胰岛素分泌功能。结果:siRNA转染体外培养的MS-1细胞,可以显著降低MS-1细胞Mas mRNA的表达。与MS-1组相比,MS-1siRNA组细胞凋亡率无差异;p-**t,p-eNOS,p-JNK,p-p38,及caspase3蛋白表达水平及bax/cl-2无差别;TNF-α mRNA的表达呈上升趋势,但未达到统计学差异;FoxO1,p22phox mRNA的表达无明显差异;上清中NO水平呈下降趋势,但未达到统计学差异。与MS-1组相比,MS-1PA及MS-1siRNA+PA组细胞凋亡率显著上升;p-**t,p-eNOS蛋白表达下降;bax/bcl-2,p-JNK,p-p38,及caspase3蛋白表达明显上升;TNF-α, p22phox mRNA的表达增加;上清NO水平下降。FoxO1mRNA的表达无差异。与MS-1PA相比,MS-1siRNA+PA组细胞凋亡率进一步增加,p-**t,p-eNOS下降

论文随机片段:小鼠为实验对象,探讨ACE2-Ang(1-7)-Mas轴对长期高脂喂养小鼠胰岛微循环及p细胞功能的影响。方法:野生型C57小鼠(WT)及ACE2基因敲除(KO)小鼠均分为普通饮食(WT, KO)和高脂饮食(WH, KH)两组,16周后,对四组小鼠行葡萄糖耐量实验(IPGTT)及葡萄糖刺激后胰岛素释放实验(IPIRT)检测胰岛功能,行胰岛素耐量实验(IPITT)检测外周组织胰岛